Кафедра лабораторної діагностики біологічних систем
Permanent URI for this collection
Browse
Recent Submissions
Item Експериментальні підходи у вивченні біологічної дії іонізуючого випромінювання : навчально-методичний посібник(Національний університет "Києво-Могилянська академія", 2021) Руссу, ІринаУ навчально-методичному посібнику І. З. Руссу, доцентки кафедри лабораторної діагностики біологічних систем НаУКМА, проаналізовано основні методи, які застосовують під час дослідження наслідків дії іонізуючої радіації на живий організм. Посібник рекомендовано студентам-біологам, фахівцям радіобіології, лабораторної діагностики і медицини.Item Оцінка морфофункціонального стану гемопоетичних клітин-попередників кордової крові для подальшої трансплантації(2013) Білько, Денис; Борбуляк, Ірина; Білько, НадіяМетою даної роботи було оцінити морфологічні особливості та функціональну активність ранніх гемопоетичних клітин-попередників кордової крові як потенційного трансплантата.Item Характеристики клітин-попередників кісткового мозку як один із критеріїв оцінки індивідуальної відповіді пацієнтів із хронічною мієлоїдною лейкемією на терапію інгібітором тирозинових кіназ(2013) Дяченко, Марія; Жалейко, Ілона; Дягіль, Ірина; Перехрестенко, Тетяна; Білько, НадіяМета: проаналізувати функціональні особливості клі тин-попередників кісткового мозку (КМ) пацієнтів з хронічною мієлоїдною лейкемією (ХМЛ) залежно від ефективності їх лікування для визначення можливої цінності характеристик цих клітин у культурі in vitro в прогнозі перебігу ХМЛ. Об’єкт і методи: аспірати КМ 32 пацієнтів з ХМЛ, які отримували терапію препаратом іматиніб (25 осіб) або гідроксикарбамідом (7 осіб) та характеризувалися різною (оптимальна, субоптимальна) відповіддю на лікування, досліджували гематологічним, культуральним, цитологічним та імуногістохімічним методами. Результати: встановлено, що функціональна активність (формування колоній і кластерів у культурі in vitro) клітин- попередників КМ пацієнтів з оптимальною відповіддю на терапію була нижчою, ніж до лікування із застосуванням іматинібу, або у пацієнтів з субоптимальною відповіддю. Проліферативний потенціал КМ пацієнтів з наявністю Ph+ клітин був вищим, ніж у пацієнтів з повною гематологічною та цитогенетичною відповіддю на терапію. Колонії та кластери, отримані в культурі КМ пацієнтів із субоптимальною відповіддю на терапію іматинібом, характеризувалися підвищеним відносним вмістом CD34+-клітин-попередників. Встановлено сильну позитивну статистично достовірну кореляцію між кількістю Ph+ клітин та кількістю клітинних агрегатів у культурах КМ пацієнтів, які отримували терапію гідроксикарбамідом, а також між індексом дозрівання клітин в клітинних агрегатах та тривалістю лікування іматинібом. Висновок: відповідь на терапію ХМЛ (із застосуванням інгібітора тирозинкінази BCR-ABL іматинібу), ймовірно, пов’язана зі змінами в популяції лейкемічних стовбурових клітин та клітин-попередників КМ, зокрема змінами їх проліферативного потенціалу, що може бути використано для моніторингу індивідуальної ефективності лікування.Item Диференціювання у кардіоміоцити окремих клонів індукованих плюрипотентних стовбурових клітин миші(2013) Малишева, C.; Будаш, Галина; Білько, Надія; Хешлер, Ю.Оцінювали ефективність диференціювання у кардіоміоцити окремих клонів індукованих плюрипотентних стовбурових клітин миші. Останні отримані у попередніх дослідженнях внаслідок репрограмування мишиних ембріональних фібробластів системою плазмід Sleeping beauty, заснованою на транспозонах. Диференціювання здійснювали у суспензійній культурі та при прикріпленні ембріоїдних тілець до культуральних планшет. Як індуктор використовували аскорбінову кислоту. Згідно з отриманими результатами, дифереціювання при прикріпленні ембріоїдних тілець відбувається на порядок ефективніше. Аскорбінова кислота стимулює отримання кардіоміоцитів.Item Особенности мейотической сегрегации хромосом 13 и 14 у гетерозиготных носителей робертсоновской транслокации der(13;14)(q10;q10)(2014) Пилип, Лариса; Спиненко, Людмила; Зукин, Валерий; Билько, НадеждаПредставлены результаты исследования особенностей мейотической сегрегации хромосом 13 и 14 в сперматозоидах пяти гетерозиготных носителей робертсоновской транслокации der(13;14) методом флюоресцентной гибридизации in situ. Выявлено преобладание альтернативного типа сегрегации хромосом (78,2 ± ± 5,7 %) с незначительным варьированием частот сбалансированных сперматозоидов (69,4—86,5 %). Сегрегацию по совместному типу с образованием несбалансированных гамет выявляли в 18,64 ± 4,90 % сперматозоидов, по типу 3:0 — в 2,48 ± 1,20 % сперматозоидов. Полученные результаты можно использовать для медико-генетического консультирования гетерозиготных носителей робертсоновской транслокации der(13;14), особенно для прогнозирования вероятности получения нормальных/сбалансированных эмбрионов при проведении циклов вспомогательных репродуктивных технологий.Item Ascorbic Acid-Induced Cardiac Differentiation of Murine Pluripotent Stem Cells : Transcriptional Profiling and Effect of a Small Molecule Synergist of Wnt/β-Catenin Signaling Pathway(2025) Ivanyuka, Dina; Budasha, Galina; Zhenga, Yunjie; Gaspara, John Antony; Chaudhari, Umesh; Fatima, Azra; Bahmanpour, Soghra; Grin, Vladislav K.; Popandopulo, Andrey G.; Sachinidisa, Agapios; Hescheler, Jürgen; Saric, TomoBackground: Reproducible and efficient differentiation of pluripotent stem cells (PSCs) to cardiomyocytes (CMs) is essential for their use in regenerative medicine, drug testing and disease modeling. The aim of this study was to evaluate the effect of some previously reported cardiogenic substances on cardiac differentiation of mouse PSCs. Methods: Differentiation was performed by embryoid body (EB)-based method using three different murine PSC lines. The differentiation efficiency was monitored by RT-qPCR, immunocytochemistry and flow cytometry, and the effect mechanistically evaluated by transcriptome analysis of treated EBs. Results: Among the five tested compounds (ascorbic acid, dorsomorphin, cyclic adenosine 3',5'-monophosphate, cardiogenol C, cyclosporin A) only ascorbic acid (AA) exerted a strong and reproducible cardiogenic effect in CGR8 cells which was less consistent in other two PSC lines. AA induced only minor changes in transcriptome of CGR8 cells after administration during the initial two days of differentiation. Cardiospecific genes and transcripts involved in angiogenesis, erythropoiesis and hematopoiesis were up-regulated on day 5 but not on days 2 or 3 of differentiation. The cardiac differentiation efficiency was improved when QS11, a small-molecule synergist of Wnt/p-catenin signaling pathway, was added to cultures after AA-treatment. Conclusion: This study demonstrates that only minor transcriptional changes are sufficient for enhancement of cardiogenesis of murine PSCs by AA and that AA and QS11 exhibit synergistic effects and enhance the efficiency of CM differentiation of murine PSCs.Item Вплив мезенхімальних стромальних клітин кісткового мозку на функціонування гемопоетичних клітин за сублетального опромінення(2025) Руссу, Ірина; Білько, НадіяМета: дослідження впливу мезенхімальних стромальних клітин на функціонування гемопоетичних клітин мишей лінії Balb/C після дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі в культурі клітин in vitro та in vivo. Методи. Для вивчення впливу стромального мікрооточення було використано модель співкультивування кровот" ворних клітин опромінених тварин та мезенхімальних клітин, що формують фідерні шари, у культурі in vitro. За допомогою барвника трипанового синього проведено оцінку кількості гемопоетичних клітин з ушкодженням цитоп" лазматичної мембрани та визначено рівень клітинної загибелі. Культивування клітин у культурі дифузійних камер in vivo дозволило оцінити проліферативний потенціал гемопоетичних стовбурових клітин кісткового мозку опромінених тварин. Результати. Дослідження взаємодії між стромальними та гемопоетичними клітинами кісткового мозку мишей Balb/C дозволило виявити модифікуючий вплив строми на рівень інтерфазної та репродуктивної загибелі клітин-попередників внаслідок дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі. Зокрема, через 2 доби відсоток загиблих клітин у суспензії з безпосереднім контактом зі стромою in vitro був зниженим порівняно з гемопоетичними клітинами, де такий контакт був відсутнім: (40,5 ± 2,6) % проти (60,1 ± 2,8) %. Спостерігалося також підвищення кількості клітинних агрегатів у культурах опромінених клітин-попередників, які заздалегідь взаємодіяли з мезенхімальними стромальними клітинами in vitro (25,2 ± 1,9 КУО), у порівнянні з клітинами, які напряму не взаємодіяли зі стромою (15,3 ± 2,8 КУО). Висновки. Співкультивування зі стромальними клітинами суттєво знижувало рівень радіаційно індукованої загибелі гемопоетичних клітин кісткового мозку та підвищувало їхню колонієутворюючу активність, проте для цього був потрібен безпосередній контакт із стромою у культурі in vitro.Item Functional activity of CD34-positive cells in chronic myeloid leukemia patients with different response to imatinib therapy [electronic resource](2020) Sviezhentseva, Ilona; Perekhrestenko, T.; Bilko, Denys; Gordienko, A.; Diachenko, M.; Dyagil, IrynaIt is believed that the reason of the leukemic clone cell resistance to treatment with tyrosine kinase inhibitors during chronic myeloid leukemia (CML) is mutations in the genome of an early bone marrow progenitor cells that are CD34-positive. Such cells, regardless of treatment, acquire ability to proliferation and differentiation. This leads to the re-expansion of the CD34+ cells. Aim: to determine the CD34 antigen expression in bone marrow and peripheral blood cells in CML patients with different response to imatinib therapy using the results of hematopoietic cells culturing and the data of flow cytometry. Methods: Bone marrow aspirate from 39 patients who were treated with imatinib was studied with cytogenetic, flow cytometry and culture methods in vitro. Results: In patients with an optimal response to imatinib therapy the number of colonies was 1.8 times lower than the number of those in the group of patients with a suboptimal response to therapy. In turn, in patients with failure of imatinib therapy the number of colonies was the highest and was 2.1 times higher than the patients with optimal response. The results of cytometric studies have shown that the number of CD34+ cells in bone marrow was significantly higher compared to the number of CD34+ cells in peripheral blood cells and increased with the acquisition of leukemic cells the resistance to imatinib. There was a direct correlation between the number of colonies and clusters in semisolid agar in vitro and the number of CD34+ cells in the bone marrow of patients. Conclusions: The correlation between the number of CD34+ cells and the number of cell aggregates in semisolid agar in vitro indicates the prognostic value of the method for determining CD34+ cells in the patient bone marrow. The parallel increase of their number in the peripheral blood will allow developing express methods for the detection of individual patient response to imatinib therapy.Item Особливості функціонування мезенхімальних стовбурових клітин за мієлодиспластичних синдромів(Галич-Прес, 2025) Луніна, Карина; Пахаренко, Маргарита; Білько, Денис; Білько, НадіяМієлодиспластичний синдром (МДС) є групою гетерогенних захворювань, що характеризуються порушеннями процесів гемопоезу та прогресуючим дефіцитом клітин крові у кістковому мозку (КМ). Ці порушення виникають унаслідок аномалій у стовбурових клітинах кісткового мозку, що призводить до порушення їхнього диференціювання, проліферації та функціонування. Мезенхімальні стовбурові клітини як ключові регулятори мікросередовища КМ забезпечують підтримку гемопоетичних стовбурових клітин (ГСК), а також беруть участь у процесах імунної регуляції, ангіогенезу та відновлення тканин. Вивчення механізмів, які впливають на функціонування мезенхімальних стромальних клітин (МСК) за мієлодиспластичних синдромів, є важливим для розуміння патогенезу цих захворювань і розробки нових терапевтичних підходів. Саме тому метою стало вивчення функціональних особливостей мезенхімальних стровбурових клітин за МДС. У цій роботі ми аналізували зразки кісткового мозку, отримані від 7 пацієнтів з МДС.Item Assessments of radionuclides influence on Wistar rats' hematopoietic system using cell culture in vivo(Видавництво ЧНУ ім. Петра Могили, 2025) Russu, Iryna; Bilko, NadiyaThe aim of this work is determination of the influence of radionuclides strontium-90 and iodine-131 on the hematopoietic system of Wistar rats, after single and long-term internal exposure to ionizing radiation.Item Оцінка функціональної активності клітин-попередників кісткового мозку щурів Wistar за умов опромінення у різних дозах(Національний науковий центр радіаційної медицини Національної академії медичних наук України, 2021) Білько, Денис; Руссу, Ірина; Пахаренко, Маргарита; Снєжкова, Єлизавета; Родіонова, Наталія; Білько, НадіяМета дослідження: оцінка функціональної активності клітин-попередників кісткового мозку щурів Wistar, опромінених у різних дозах, із застосуванням культур клітин у дифузійних камерах in vivo та in vitro.Item Functional activity of hematopoietic stem and progenitor cells under the acute and chronic exposure to ionizing radiation in different doses(2021) Russu, Iryna; Bilko, NadiyaThe aim of the current study was investigation of functional properties of hematopoietic stem and progenitor cells of Balb/C mice under external acute and chronic exposure to irradiation in different doses.Item Хітозан-колагенові плівки для вирощування нащадків мезенхімальних стовбурових клітин(2013) Білько, Денис; Загородько, О.; Антонюк, Наталія; Колесник, Ірина; Борбуляк, ІринаРозроблено методику отримання плівок на основі хітозан-колагенових комплексів, придатних для вирощування нащадків мезенхімальних стовбурових клітин. Отримані плівки мають задовільні механічні та оптичні характеристики, що уможливлює їх використання як біосумісних матриць для культивування адгезивно залежних клітин. Експерименти in vivo показали, що отримані мембрани резорбують у організмі протягом 40 діб.Item Estimation of hematopoietic progenitor cells in patients with chronic myeloid leukemia with resistance to tyrosine kinase inhibitors(2023) Bilko, Nadiya; Dyagil, Iryna; Russu, IrynaChronic myeloid leukemia (CML) is a clonal oncological disease associated with the formation of chimeric bcr-abl gene, the product of which is active BCR-ABL tyrosine kinase playing a major role in the pathogenesis of CML. Data obtained in recent years allowed to assume the decisive role not only of hematopoietic stem cells, but also of bone marrow (BM) progenitor cells in both onset and progression of the disease. However, information on the functional characteristics of BM hematopoietic progenitor cells in different CML phases, in terms of therapeutic inhibition of BCR-ABL tyrosine kinase and the resistance to Imatinib, is not sufficient today and some findings are contradictory. Hence, the aim of this investigation was the estimation of BM hematopoietic progenitor cells in patients with CML with the resistance to tyrosine kinase inhibitors, using in vitro cell culture.Item Комплексна оцінка стану гемопоетичної системи лабораторних тварин в умовах внутрішнього опромінення стронцієм-90(2012) Борбуляк, Ірина; Родіонова, Н.; Білько, НадіяВ роботі досліджені особливості функціонування кровотворної системи на рівні стовбурової клітини і клітин-попередників щурів при дії радіонукліда 90Sr в умовах його тривалого і одноразового введення. В результаті культивування кровотворних клітин-попередників тварин, які зазнали внутрішнього опромінення 90Sr, виявлені такі особливості, як пригнічення колонієутворюючої здатності кровотворних клітин-попередників кісткового мозку в культурі і поява циркулюючих клітин-попередників у периферичній крові, що вказує на порушення основ гемопоезу. Показано, що в результаті впливу радіонукліда 90Sr відбувається пошкодження гемопоетичного мікрооточення, яке характеризується пригніченням колонієутворюючої активності стромальних кістковомозкових клітин-попередників і частковою втратою їх здатності до підтримки кровотворення в культурі у складі фідерного шару.Item Характер взаємодії опромінених і неопромінених клітин у культурі дифузійних камер in vivo(2013) Білько, Денис; Сенюк, О.; Руссу, Ірина; Жалейко, І.; Білько, НадіяМета: визначити характер взаємодії між неопроміненими клітинами кісткового мозку мишей та опроміненим мікрооточенням у культурі дифузійних камер in vivo. Матеріали і методи. Для вивчення особливостей взаємодії між клітинами було використано оригінальну модель культивування кістковомозкових клітин інтактних мишей лінії Balb/c у черевній порожнині опроміненої особини у гелевих дифузійних камерах, що забезпечували доступ живильних речовин та сигнальних молекул ззовні. Результати. Виявлено, що клітини кісткового мозку мишей, які не були опромінені, піддавалися безпосередньому впливу факторів мікрооточення організму опроміненої тварини реципієнта. Так, при культивуванні клітин в організмі неопромінених мишей було виявлено низькі показники колонієутворення у зв’язку з відсутністю додаткового викиду ростових факторів. У той же час опромінення тварин реципієнтів камер та, меншою мірою, обробка їх циклофосфамідом, який є цитостатиком, підвищували проліферативну активність кістковомозкових клітин, які знаходилися у камері, що свідчило про значний вплив факторів, які були виділені клітинами у відповідь на дію іонізуючої радіації. Вплив сигнальних молекул здійснювався крізь стінку дифузійної камери, викликаючи стимуляцію колонієутворюючої активності. При цьому слід зазначити, що для передачі сигналу безпосередній контакт між клітинами не був необхідним. Висновки. Стимулюючий вплив на колонієутворюючу здатність неопромінених гемопоетичних клітин попередників, поміщених у дифузійні камери, який здійснюється клітинними та позаклітинними структурами, що формують зовні мікрооточення, пов'язується із дією ростових факторів, які виробляються опроміненими клітинами та впливають на неопромінені клітини через стінку камер, що недоступна для клітин, проте вільно пропускає дифундуючі молекули.Item Дослідження дії іонізуючої радіації у сублетальній дозі на кровотворення мишей Balb/c та щурів Wistar(Інститут ядерних досліджень, 2025) Руссу, Ірина; Білько, НадіяМетою роботи є дослідження впливу іонізуючої радіації у сублетальній дозі на кровотворення мишей Balb/C та щурів Wistar, а також оцінка процесу відновлення гемопоезу після опромінення.Item Ефективність та безпека застосування екзосом для лікування інфекційних захворювань викликаних SARS-CoV-2(2025) Будаш, Галина; Білько, НадіяКоронавірусна хвороба (COVID-19) - важке гостре респіраторне захворювання, спричинене збудником важкого гострого респіраторного синдрому коронавірусу 2 (SARS-CoV-2). Для боротьби з клінічними ускладненнями, спричиненими вірусом SARS-CoV-2, існує нагальна потреба у надійній терапії. Екзосоми — це везикули, які відіграють роль у міжклітинній комунікації. Екзосоми є паракринними та ендокринними медіаторами, які містять набір хемокінів, факторів росту, мРНК і мікроРНК з протизапальними, регенеративними та імуномодулюючими функціями. Екзосом можуть бути плеотропним терапевтичним засобом у боротьбі з інфекцією SARS-CoV-2. В даній роботі ми провели аналіз поточних досліджень, що включають клінічне випробування застосування екзосом для лікування COVID-19. Метою більшості досліджень є перевірка безпечності та ефективності препаратів. Екзосоми отримані з різних джерел мають багато спільних характеристик, однак вони також можуть відрізнятися за функціональністю. Переважна кількість випробувань була націлена на дослідження екзосом отриманих з МСК джерелами отримання яких є плацента, пуповина, амніотична рідина, жирова тканини та кістковий мозок. Крім того екзосоми можуть бути використані як носії ліків збагачених CD24, а током можуть бути отримані з інших джерел, наприклад вірус-специфічних Т-клітин. Нецільовий метод доставки екзосом в організм людини може бути причиною невисокої ефективності застосування екзосом. Новітнім методом цільової доставки екзосом може бути їх розпилення замість введення внутрішньовенно. Хоча даних все ще недостатньо для широко застосування екзосом для лікування короновірусноїхвороби, вже можна охарактеризувати сучасний стан досліджень, джерела отримання, методи доставки та основні групи дослідників та компанії, що працюють над цією темою.Item Особливості функціонування гемопоетичних клітин-попередників у пацієнтів із мієлодиспластичним синдромом, лікованих леналідомідом(2025) Білько, НадіяПул стовбурових клітин – основне місце злоякісної трансформації, тому вивчення клітин-попередників при порушеннях кровотворення є одним із найважливіших шляхів розкриття патогенезу злоякісних гемобластозів. Мієлодиспластичний синдром (МДС) – це захворювання системи крові, яке характеризується нестабільністю геному і гетерогенністю. Лікування МДС на ініціальних етапах розвитку процесу (РАНБ I) обмежується імуномодуляторами, одним із яких є леналідомід (lenalidomide). Відомо, що препарат інгібує проліферацію злоякісних клітин, пригнічуючи аномальне клонування шляхом збільшення апоптозу Del(5q) клітин. Проте рівень дії леналідоміду на гемопоетичну систему при МДС остаточно ще не встановлений. Вважається, що він посилює клітинний імунітет, опосередкований T-клітинами та природними клітинами-кілерами, і пригнічує секрецію протизапальних цитокінів. Метою дослідження було вивчення особливостей функціонування гемопоетичних клітин-попередників у разі дії імуномодулюючого препарату леналідоміду у хворих на РАНБ I. У роботі здійснено оцінювання показників периферійної крові та колоніє- і кластеро-утворюючої здатності гемопоетичних клітин-попередників кісткового мозку в культурі з напіврідким агаром. Проведене дослідження показало, що дія імуномодулюючого препарату леналідоміду поширюється не тільки на імунну систему, але й на клас найближчих нащадків гемопоетичної стовбурової клітини – гемопоетичних клітин-попередників, стимулюючи в частини з них (24 %) колонієутворення кісткового мозку в культурі і проліферацію всіх трьох ростків у периферійній крові, що є викликом для продовження пошуків терапевтичних підходів у лікуванні МДС, пов’язаних зі стимуляцією ініціальних відділів гемопоезу.Item Експериментальне обґрунтування ефективності впливу бінарних променевих технологій на злоякісні клітини людини in vitro(Інститут ядерних досліджень, 2024) Лавренчук, Галина; Талько, Вікторія; Чернишов, Андрій; Дмитрієва, І.Анотація до доповіді на XXXI Щорічній науковій конференції Інституту ядерних досліджень НАН України, (м. Київ, 27-31 травня 2024 року). Мета роботи: дослідження структурних та морфо-функціональних змін у тест-системі злоякісних клітин недрібноклітинного раку легень людини (лінія А-549), що знаходяться у стані спокою (стаціонарній фазі росту) при поєднанні рентгенівського випромінювання з гадолінійвмісним фотон-захоплювальним агентом "Дотавіст" та червоного світла (630 нм) із фотосенсибілізатором "Фотолон".